In vitro тест на аллергию

Метод определения
Иммунохемилюминесцентный.

Исследуемый материал
Сыворотка крови

Панель разные аллергены:

Смесь аллергенов травы: колосок душистый; рожь многолетняя; тимофеевка; рожь культивированная; бухарник шерстистый (GP3) IgE
Рожь многолетняя (G5) IgE
Подорожник (W9) IgE
Полынь обыкновенная (W6) IgE
Соевые бобы (F14) IgE
Арахис (F13) IgE
Лошадь, перхоть (Е3) IgE
Собака, эпителий (Е2) IgE
Кошка, эпителий (Е1) IgE
Пшеничная мука (F4) IgE
Морковь (F31) IgE
Коровье молоко (F2) IgE
Фундук (F17) IgE
Плесень Alternaria tenuis (M6) IgE
Яичный белок (F1) IgE
Клещ Dermatophagoides pteronyssinus (D1) IgE
Ольха (T2) IgE
Клещ Dermatophagoides farinae (D2) IgE
Берёза (T3) IgE
Лещина обыкновенная (T4) IgE

Смешанная панель распространённых, бытовых и пищевых аллергенов предназначена для скринингового обследования с целью выявления значимых аллергенов при подозрении на аллергию. Результат выдаётся с указанием концентрации и класса IgE по каждому аллергену в отдельности, кроме смеси трав. По смеси трав результат выдается суммарно.

Пределы определения: 0,10–100 kU/L.

Предпочтительно выдержать 4 часа после последнего приема пищи, обязательных требований нет. Исследование нежелательно проводить на фоне применения препаратов глюкокортикоидных гормонов (следует проконсультироваться с лечащим аллергологом относительно целесообразности отмены). Антигистаминные препараты не оказывают влияния на результат.

Важно! Не следует проводить исследование на фоне применения терапии биотином или использования биотина в пищевых добавках. Высокая концентрация биотина в образце может привести к интерференции (ложное занижение). Целесообразно отменить терапию биотином за 2 дня до исследования.

Диагностика аллергических заболеваний (бронхиальная астма, поллинозы, атопический дерматит, экзема, пищевая аллергия, респираторные аллергозы) в следующих случаях:

ранний детский возраст (кожные пробы можно делать только детям старше 5 лет);
высокая степень сенсибилизации пациента, когда возможно развитие анафилактического шока;
непрерывно рецидивирующее течение заболевания без периодов ремиссии;
невозможность отмены антиаллергических препаратов, которые могут повлиять на результаты кожных проб;
поливалентная сенсибилизация, когда нет возможности провести тестирование in vivo сразу со всеми предполагаемыми аллергенами в ограниченные сроки обследования;
уртикарный дермографизм;
резко изменённая реактивность кожи;
низкая реактивность кожи, в частности, у лиц раннего детского возраста;
острая фаза заболевания и, в частности, поражения кожных покровов;
ложноположительный или ложноотрицательный результат при кожном тестировании.

Интерпретация результатов

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Единицы измерения в лаборатории ИНВИТРО: kU/L.

Комментарий к полученному результату в kU/L содержит указание на класс, соответствующий классификации кожных проб и интерпретацию результата по таблице соответствий:

Концентрация специфического IgЕ, kU/L	Класс	Интерпретация результата
< 0,35		Отрицательный — НОРМА
0,35 — 0,69	I	Неоднозначный, часто без клинических проявлений
0,70 — 3,49	II	Слабо позитивный
3,50 — 17,49	III	Позитивный, с выраженными клиническими проявлениями
17,50 — 52,49	IV
52,50 — 99,99	V
> 100	VI

Референсные значения: <0,35 kU/L (соответствуют классу 0, интерпретация — отрицательно).

Повышение уровня:

аллергические заболевания;
поллинозы (пыльцевая аллергия);
бронхиальная астма;
респираторные аллергозы (риниты, синуситы, ларингиты, трахеиты, бронхиты, пневмонии, альвеолит);
ангионевротический отек Квинке;
крапивница;
аллергический конъюнктивит.

Источник

Метод определения
Иммуноанализ.

Исследуемый материал
Сыворотка крови

Определение субклассов IgG к пищевым аллергенам.

Антитела класса IgG к пищевым аллергенам — потенциальный фактор не IgE-опосредованных реакций повышенной чувствительности к компонентам пищи.

Список аллергенов: авокадо, коровье молоко, ананас, морковь, апельсин, дыня кванталупа, арахис, мягкий сыр, баклажан, овёс, банан, огурец, баранина, оливки, бета-лактоглобулин, орех колы, виноград, палтус, глютен, чёрный перец, говядина, перец чили, голубика, персик, грейпфрут, петрушка, грецкий орех, пшеница, гречневая крупа, пшено, грибы шампиньоны, пятнистая фасоль, груша, дрожжи пекарские, рожь, дрожжи пивные, сардины, зелёный горошек, свекла, зелёный сладкий перец — p.Capcsicum, свинина, земляника, сельдерей, индейка, семя подсолнуха, йогурт, слива, казеин, соевые бобы, кальмар, стручковая фасоль, камбала, рис, сыр брынза, капуста брокколи, сыр чеддер, капуста кочанная, томаты, картофель, треска, кофе, тростниковый сахар, краб, тунец, креветки, кабачок, кролик, устрицы, кукуруза, форель, кунжут, хек, табак, цветная капуста, курица, цельное зерно ячменя, лимон, чёрный чай, лосось, чеснок, лук, швейцарский сыр, масло сливочное, шоколад, мёд, яблоко, миндаль, яичный белок, молоко козье, яичный желток.

Этот вид исследований появился в арсенале лабораторной клинической диагностики относительно недавно. Теоретически он основывается на данных научных исследований, демонстрирующих, что определённые субклассы IgG могут быть связаны с реакциями дегрануляции базофилов и активации системы комплемента (включенными в механизмы аллергии и анафилаксии), и наблюдениями случаев сочетания атопии с присутствием в сыворотке крови антител IgG к пищевым аллергенам в высокой концентрации. Повышенная чувствительность к компонентам пищи в большинстве случаев имеет в своей основе иммунные механизмы, связанные с IgE (пищевая аллергия).

Наиболее распространённые клинические проявления пищевой аллергии связаны с классическими симптомами аллергии (атопический дерматит, крапивница, анафилаксия, аллергический ринит), симптомами, связанными с желудочно-кишечным трактом (тошнота, расстройство кишечника, боли в животе), есть данные о связи повышенной пищевой чувствительности с мигренью, синдромом хронической усталости. В части случаев реакции непереносимости пищи связывают с участием иммуноглобулинов классов IgG, иммунных комплексов, механизмами клеточного иммунитета, неимунными механизмами (дефицит ферментов).

Лабораторная диагностика не-IgE-опосредованных реакций пищевой непереносимости может включать в себя тестирование на присутствие в крови IgG-антител к различным пищевым аллергенам. IgG-опосредованные реакции повышенной чувствительности к пище относятся к реакциям замедленного типа, они наблюдаются при длительном поступлении определённого аллергена с пищей. Результаты тестирования на присутствие IgG к пищевым аллергенам подсказывают оптимальное изменение диеты с исключением или ротацией отдельных компонентов пищи, что может заметно улучшить состояние пациента.

Следует отметить, что клиническое значение факта выявления в крови пациента значимого количества IgG к пищевым аллергенам неоднозначно, интерпретация полученных данных затруднена тем, что положительный результат может быть вариантом нормы, выявленные иммуноглобулины класса G могут выполнять функции блокирующих антител, которые уменьшают выраженность аллергических реакций, протекающих с участием специфических IgE.

Тестирование на IgG антитела к панели пищевых аллергенов целесообразно проводить в комплексе других исследований в трудных случаях диагностики пищевой непереносимости, результаты подлежат интерпретации врачом-аллергологом.

Источник

Метод определения
Хемилюминесцентный иммуноанализ.

Исследуемый материал
Сыворотка крови

Смешанная панель разных аллергенов предназначена для скринингового обследования с целью выявления значимых аллергенов при подозрении на аллергию.

Панель разные аллергены:

Смесь аллергенов травы: колосок душистый; рожь многолетняя; тимофеевка; рожь культивированная; бухарник шерстистый (GP3) IgE
Рожь многолетняя (G5) IgE
Подорожник (W9) IgE
Полынь обыкновенная (W6) IgE
Плесень Alternaria tenuis (M6) IgE
Клещ Dermatophagoides pteronyssinus (D1) IgE
Ольха (T2) IgE
Клещ Dermatophagoides farinae (D2) IgE
Береза (T3) IgE
Лещина обыкновенная (T4) IgE

Смешанная панель распространенных бытовых и растительных аллергенов предназначена для скринингового обследования с целью выявления значимых аллергенов при подозрении на аллергию. Результат выдается с указанием концентрации и класса IgE по каждому аллергену в отдельности, кроме смеси трав. По смеси трав результат выдается суммарно.

Пределы определения: 0,10-100 kU/L.

Предпочтительно выдержать 4 часа после последнего приема пищи, обязательных требований нет. Исследование нежелательно проводить на фоне применения препаратов глюкокортикоидных гормонов (следует проконсультироваться с лечащим врачом-аллергологом относительно целесообразности отмены). Антигистаминные препараты не оказывают влияния на результат.

диагностика аллергических заболеваний (бронхиальная астма, поллинозы, атопический дерматит, экзема, респираторные аллергозы) в следующих случаях:

ранний детский возраст (кожные пробы можно делать только детям старше 5 лет);
высокая степень сенсибилизации пациента, когда возможно развитие анафилактического шока;
непрерывно рецидивирующее течение заболевания без периодов ремиссии;
невозможность отмены антиаллергических препаратов, которые могут повлиять на результаты кожных проб;
поливалентная сенсибилизация, когда нет возможности провести тестирование in vivo сразу со всеми предполагаемыми аллергенами в ограниченные сроки обследования;
уртикарный дермографизм;
резко измененная реактивность кожи;
низкая реактивность кожи, в частности, у пациентов раннего детского возраста;
острая фаза заболевания и, в частности, поражения кожных покровов;
ложноположительный или ложноотрицательный результат при кожном тестировании.

Интерпретация результатов

Единицы измерения: kU/L.

Референсные значения: < 0,35 kU/L (соответствуют классу 0, интерпретация – отрицательно).

Интерпретация результатов

Комментарий к полученному результату в kU/L содержит указание на класс, соответствующий классификации кожных проб, и интерпретацию результата по таблице соответствий:

Концентрация специфич. IgЕ, kU/L	Класс	Интерпретация результата
< 0,35		Отрицательный НОРМА
0,35 — 0,69	I	Неоднозначный, часто без клинических проявлений
0,70 — 3,49	II	Слабо позитивный
3,50 — 17,49	III	Позитивный, с выраженными клиническими проявлениями
17,50 — 52,49	IV
52,50 — 99,99	V
> 100	VI

Аллергические заболевания.
Поллинозы (пыльцевая аллергия).
Бронхиальная астма.
Респираторные аллергозы (риниты, синуситы, ларингиты, трахеиты, бронхиты, пневмонии, альвеолит).
Ангионевротический отек Квинке.
Крапивница.
Аллергический конъюнктивит.

Источник

Диагностика

В диагностике лекарственной аллергии выделяют следующие основные моменты:

сбор аллергологического анамнеза;
методы диагностики лекарственной аллергии in vitro (лабораторная диагностика);
методы диагностики лекарственной аллергии in vivo (провокационные тесты на больном).

Сбор аллергологического анамнеза является важным этапом в диагностике лекарственной аллергии. Необходимо уточнить:

страдает ли сам больной или его родственники какими-либо аллергическими заболеваниями;
есть ли профессиональный контакт с медикаментами;
были ли прежде аллергические реакции на лекарственные препараты, через какой интервал времени после приема они развивались (быстрые/замедленные). Необходимо выяснить характер этих реакций конкретно на каждый препарат (укладываются ли они в представления об аллергических реакциях или относятся к другим нежелательным реакциям);
возникали ли аллергические реакции от применения наружных средств (лечебных мазей, кремов и других форм), которые могут быть обусловлены как лекарствами, входящими в их состав, так и мазевой основой или консервантами, красителями;
как пациент переносил вакцинацию и введение лечебных сывороток, препаратов крови;
отмечается ли повышенная чувствительность к бытовым, пыльцевым, пищевым, эпидермальным аллергенам, косметическим средствам и др.;
менялись ли аллергические проявления с течением времени (локальные проявления или трансформация в полисистемную реакцию).

Лабораторные методы диагностики лекарственной аллергии (in vitro)

Необходимо сразу отметить, что даже с позиций сегодняшнего дня ни лабораторная диагностика, ни кожное тестирование не дает 100% гарантии отсутствия или наличия лекарственной аллергии при применении конкретного препарата. Это объясняется тем, что в большинстве случаев лекарственная аллергия развивается не на исходный медикамент, а на продукты его метаболизма, механизмы формирования аллергических реакций также разнообразны и не подтверждаются неким одним универсальным методом. Наконец, в ряде случаев в формировании нежелательной реакции, внешне похожей на аллергическую, вовсе нет иммунных механизмов (псевдоаллергия). Поэтому отрицательный результат проводимого обследования может свидетельствовать только о низком риске развития аллергии при использовании данного лекарственного препарата.

Общим показанием для лабораторной диагностики является необходимость назначения лекарственного средства при:

наличии в анамнезе аллергических заболеваний;
тяжелых проявлениях лекарственной аллергии (шок и т. д.) в анамнезе;
подозрении на профессиональную лекарственную аллергию;
непереносимости лекарств и исключения аллергической реакции на медикамент;
обширных поражениях кожи и невозможности выполнить кожные пробы;
необходимости обследования на фоне приема антигистаминных препаратов и высоких доз глюкокортикостероидов (ГКС).

Лабораторные методы диагностики направлены на выявление:

специфических IgE;
сенсибилизированных Т-лимфоцитов.

Ранее в диагностике лекарственной аллергии II и III типов важная роль отводилась выявлению специфических IgG и IgM, однако проведенные в последние годы исследования показали их низкую ценность, поскольку они выявляются у каждого принимавшего лекарственный препарат и являются результатом иммунного ответа организма, а не критерием диагностики лекарственной аллергии.

Кроме того, с позиций сегодняшнего дня достоверность старых иммунологических методик (реакция дегрануляции тучных клеток, РПГА и др.) в аллергологии подвергается большому сомнению, поскольку множество внешних и внутренних факторов способны оказать влияние на конечный результат исследования.

В лабораторной диагностике реакций I типа (IgE-зависимых) используют:

определение специфических IgE к определенным медикаментам методом иммуноферментного анализа (ИФА) или радиоаллергенсорбентного теста (РАСТ) с использованием специальных наборов для диагностики лекарственной аллергии «Аллергодиски»;
определение медиаторов аллергического воспаления (гистамина, триптазы, лейкотриенов) в периферической крови, назальных и бронхиальных секретах и моче. Необходимо отметить, что уровень гистамина в сыворотке крови повышен только в течение первого часа после острой аллергической реакции, а затем он приходит к норме. Повышение уровня триптазы в крови не всегда специфично и выражено через 1 и 6 часов от начала аллергии;
методику CASTs (с целью диагностики лекарственной аллергии), в которой с помощью проточного цитофлюоресциметра определяются активированные базофилы, несущие специфические антигены CD64+ и CD203. К сожалению, из-за высокой стоимости данный метод широко не используется в нашей практике;
реакцию дегрануляции тучных клеток (РДТК). Используют сыворотку крови больных (содержащую IgЕ), тучные клетки крыс и исследуемые лекарственные аллергены. Если в исследуемой сыворотке есть специфические IgЕ против лекарственного агента, они связываются с аллергеном на поверхности тучной клетки, вызывая ее дегрануляцию. Реакцию оценивают микроскопически по изменению морфологии тучных клеток. Число дегранулировавших клеток сравнивают с контрольными образцами (в которых сыворотку больного смешивают с тучными клетками без добавления аллергенов). Реакция считается положительной, если разница дегранулировавших клеток в опытном и контрольном образцах составляет более 20%;
реакцию торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ). РТМЛ in vivo является одновременно лабораторным (подсчет числа лейкоцитов в смывах из полости рта до и после контакта с аллергеном) и провокационным тестом (возможно появление микросимптомов аллергии). Реакция расценивается как положительная, если число лейкоцитов в смывах через 15-30 минут после контакта с аллергеном снижается в 2 или более раза.

Определение специфических IgE свидетельствует о возможности развития лекарственной аллергии I типа с тяжелыми последствиями. Достоверность результатов реакции дегрануляции тучных клеток и реакции торможения миграции лейкоцитов не превышает 60%, однако доступность и дешевизна не позволяют в наших условиях полностью отказаться от их использования.

В лабораторной диагностике реакций II типа (IgE-независимые):

определяют титр комплемента по 50% гемолизу эритроцитов (реакция диагностически значима при исследовании на пике клинических проявлений). В ходе цитотоксической реакции белки комплемента расходуются, титр комплемента снижается. В случае аллергической цитопении отмечаются изменения в анализе периферической крови;
реакция спецгемолиза также может помочь в выявлении виновника аллергической реакции цитотоксического типа, однако для этой методики характерна низкая специфичность.

В лабораторной диагностике реакций III типа (IgE-независимые) применяется:

выявление циркулирующих иммунных комплексов (существуют методики исследования состава иммунных комплексов, а также гистохимического выявления отложений иммунных комплексов в тканях после биопсии);
косвенным признаком иммунокомплексной реакции является снижение титра комплемента (он активируется и расходуется в ходе реакции III типа).

Диагностика лекарственной аллергии IV типа (IgE-независимые) состоит в:

определении наличия сенсибилизированных лимфоцитов (реакция бласттрансформации лимфоцитов в присутствии тех или иных аллергенов с морфологическим учетом бластов), данный метод — один из немногих, который сегодня широко используется в развитых странах;
исследовании продукции цитокинов лимфоцитами после контакта с вероятным аллергеном в реакции торможения миграции лейкоцитов.

________________
Вы читаете тему:
Современные представления о лекарственной аллергии (Артишевский С. Н., Барановская Т. В., Борушко А. И. Белорусская медицинская академия последипломного образования. «Медицинская панорама» № 9, октябрь 2009)

Понятие о лекарственной аллергии.
Этиология.
Патогенез.
Классификация. Генерализованные поражения.
Кожные проявления.
Диагностика. Лабораторные методы (in vitro).
Методы диагностики in vivo.
Лечение лекарственной аллергии.
Неотложная помощь при анафилактическом шоке.
Профилактика.

Источник