Молекулярная диагностика аллергии что это такое

Молекулярная диагностика аллергии что это такое thumbnail

Можно ли есть яйцо при аллергии на яичный белок и почему не помогает АСИТ? О молекулярной диагностике – методе современного анализа на аллергены рассказывает Ольга Гурьевна Елисютина, врач аллерголог-иммунолог, кандидат медицинских наук, ведущий научный сотрудник отделения аллергии и иммунопатологии кожи Института иммунологии ФМБА России.

Три года Александр Николаевич честно проходил курс аллергенспецифической иммунотерапии (АСИТ), но так и не избавился от симптомов поллиноза. В медцентре, где его лечили, не смогли объяснить – почему. Вроде кожные пробы и анализ крови на специфические иммуноглобулины Е (IgE) дали положительный результат… Отправили разбираться в Институт иммунологии.

Там ему предложили провести более точный анализ.

Почему не помогает АСИТ

«Пациенты нас часто спрашивают: аллергия на пыльцу березы диагностирована, а АСИТ не помогает, – рассказывает Ольга Гурьевна. – Почему? Дело в том, что, например, у пыльцы березы не один, а минимум шесть аллергенных компонентов. Они представляют собой охарактеризованные молекулы (то есть строение и функции этих молекул хорошо изучены, а также известно, к какому семейству белков они относятся и какие реакции могут вызывать), которые, как правило, являются белками или гликопротеинами, и именно они определяются специфическими IgE-антителами.

Истинную сенсибилизацию вызывают только определенные аллергенные компоненты. Если эти молекулы связываются со специфическими IgE-антителами более чем у 50% пациентов с аллергией к одному и тому же источнику, их называют мажорными, если менее чем у 10% пациентов – минорными. Главный, или мажорный, аллерген пыльцы березы – Bet v 1 (названия аллергенов образованы от латинских наименований; Bet – это Betula verrucosa, береза повислая, или бородавчатая). А есть еще минорные аллергены, например Bet v 2, Bet v 4 и другие».

Кожные пробы, как и анализы крови на специфические IgE, как правило, проводят с экстрактами аллергенов, и они показывает реакцию на все аллергены березовой пыльцы. Положительный результат таких исследований может означать иммунный ответ как на мажорный Bet v 1, так и на минорные Bet v 2 и Bet v 4.

Точно определить, какой именно компонент вызывает аллергию, помогает молекулярная аллергодиагностика: она определяет уровень специфических иммуноглобулинов Е не к экстрактам аллергенов, а к отдельным их компонентам.

Именно такой анализ провели Александру Николаевичу. Тут-то и выяснилось, почему АСИТ не помогал! Оказывается, у него специфические IgE-антитела вырабатывались не к основному, мажорному аллергену пыльцы березы Bet v 1, а к Bet v 4. Этот компонент является маркером перекрестных реакций между пыльцой деревьев, злаковых и сорных трав. И действительно, после дополнительных исследований у Александра Николаевича обнаружилась истинная сенсибилизация к аллергенам тимофеевки Phl p 1, 2, 4, 5, 7. Лечили его аллергенами пыльцы березы, а надо было аллергенами трав, потому что Bet v 4 обладает перекрестными свойствами с их пыльцой, точнее, с аллергеном Phl p 7.

Кому нужна молекулярная диагностика

Как это работает

«При традиционном методе диагностики берут источники аллергенов, например, пыль, плесневые грибы, делают из них экстракты и с ними ставят кожные пробы, – объясняет Ольга Гурьевна. – Но такой экстракт содержит много разных молекул, и когда мы проводим диагностику с использованием экстрактов, будь то кожные пробы или определение специфических IgЕ, мы не можем установить, какой именно компонент вызывает у пациента аллергическую реакцию».

А молекулярная диагностика может! Проводят ее с помощью определения специфических IgE-антител к отдельным компонентам (в лабораториях доступны лишь немногие из них) или ISAC-теста (ISAC – иммунный твердофазный аллергочип), разработанного учеными Венского медуниверситета. Кровь на анализ можно брать как из вены, так и из пальца, что очень удобно для детей.

«ISAC-тест позволяет определить сразу 112 компонентов из 51 источника аллергенов, – комментирует доктор Елисютина. – Когда мы стали с ним работать, то поняли, что у нас случались ошибочные назначения. Бывало, человек рассказывал, что летом задыхается, мы назначали АСИТ тимофеевкой, но безрезультатно. А молекулярный анализ показал, что пациент сенсибилизирован к тимофеевке за счет минорного Phl p 7 и такая терапия ему вряд ли поможет».

Что еще дает тест

Молекулярная диагностика неоценима при пищевой аллергии. Например, в белке яйца описано минимум пять белковых компонентов: овомукоид (Gal d 1), овальбумин (Gal d 2), кональбумин (Gal d 3), лизоцим (Gal d 4), ливетин (Gal d 5). Какие-то из этих белков термостабильны, то есть не разрушаются при нагревании, какие-то – термолабильны: нагревание снижает их аллергенное действие до нуля.

«Овомукоид – самый страшный компонент белка куриного яйца, он термостабилен, – говорит Ольга Гурьевна. – И если у ребенка сенсибилизация именно к нему, то яйца ему нельзя ни в каком виде. А если малыш сенсибилизирован к овальбуминам, то варившееся 10–20 минут яйцо он может есть. Без молекулярной диагностики мы бы такие рекомендации дать не смогли, а между тем это очень важно, потому что дети должны расти, получать белок из разных источников».

То же касается молока. Сывороточные альбумины в нем разрушаются кипячением, а вот казеин Bos d 8, который вызывает самые тяжелые реакции, термостабилен. Ребенку с аллергией к казеину вообще никакое молоко нельзя: ни коровье, ни козье, ни даже грудное. Только гидролизат (специальное детское питание, где белки расщеплены до аминокислот – отдельных белковых компонентов).

Кому нужна молекулярная диагностика

О вреде самолечения

«Не советую заниматься самолечением и самодиагностикой, тратить на это деньги, – предупреждает Ольга Гурьевна. – Пациент должен прийти к врачу-аллергологу, а тот уже разберется, аллергия ли это. Может, это вирусная инфекция или кожный зуд из-за сахарного диабета – мало ли какие могут быть причины всех тех состояний, которые наши пациенты называют аллергией!»

«Часто бывает: краснеет лицо, и сразу мысль – аллергия! – продолжает врач. – А я понимаю, что это чисто кожная проблема: розацеа (хроническое заболевание кожи лица с покраснением и сыпью.– Ред.) или угревая болезнь. Тогда вообще любая аллергодиагностика – пустая трата денег».

«Мы собираем анамнез, проводим кожные пробы, анализ на специфические IgE, и только когда неэффективен АСИТ или мы не можем понять, почему клинические данные не соответствуют лабораторным, назначаем ISAC-тест. К тому же правильно интерпретировать и прокомментировать полученные результаты может только клиницист, который работает с пациентами», – резюмирует доктор Елисютина.

Елена Туева

Источник

Молекулярная диагностика аллергии что это такое

Возможности медицины безграничны,
ограничены возможности пациента.

Сегодня хочу поговорить о видах молекулярной  диагностики : ImmunoCap, Immulite, Аллергочип, Alex Allergy Explorer. Постараюсь перечислить преимущества такой  диагностики перед другими видами исследований в области аллергологии. Рассмотрю варианты, в каких случаях молекулярную диагностику  назначают и в каких лабораториях можно сдать кровь на анализ. Отвечу на вопрос — почему в Москве берут кровь из пальца, а в других городах только венозную кровь

Виды молекулярной диагностики:

ImmunoCap — название вида диагностики.
Аллергочип — название самого анализа.
Аллергочип делают методом ImmunoCap.

ImmunoCAP ISAC (Phadia) ( Швеция)

Это очень точная и полностью автоматизированная тест-система для измерения IgE-антител, разработанная компанией Phadia. Результат измеряется в единицах (кU/l).

ImmunoCAP — не отображает сами белки, он отображает наличие антител к предполагаемому аллергену и делает это на молекулярном уровне. Метод диагностирует аллергию на самой ранней стадии.

ImmunoCAP не требует отмены принимаемых лекарств (антигистаминных препаратов, гормонов и монтелукастов — сингуляр, сингалон, монтелар и т.п.).

Молекулярная диагностика аллергии что это такоеImmunoCAP (кликабельно)

Метод IMMUNOCAP отлично ищет ингаляционные аллергены, но на пищевые аллергены этот метод часто выдает ложные результаты.

Для выявления истинной аллергии на продукты можно сдать :

  • Аллергочип, где выявляются минорные и мажорные белки предполагаемого аллергена.
  • Прик — тесты именно с теми продуктами на которые есть подозрения (приносите с собой).
  • Провокационные тесты (самый опасный вид диагностики, о котором расскажу в отдельной статье).

IMMULITE ( Англия)

IMMULITE, как и ImmunoCap это вариант молекулярной диагностики, проводимый на точном иммунохимическом анализаторе, который ищет самые низкие концентрации IgE.
Отличается от Immunocap страной — производителем оборудования.

IMMULITE не требует отмены антигистаминных препаратов до обследования.

Аллергочип (метод ImmunoCAP ISAC)

Самый информативный метод диагностики аллергии с младенческого возраста.

Анализ исследует 112 аллерго компонентов и 51 белок распространенных аллергенов. Результаты аллергочипа показывают наличие реакции на минорные и мажорные белки.

Мажорный белок — это показатель истинной аллергии.
Минорный белок — это показатель перекрестной реакции.

Эти дан­ные по­мо­гут опре­де­лить ис­точ­ни­ки ал­лер­гии: один-един­ствен­ный, несколь­ко близ­ко­род­ствен­ных или мно­же­ство раз­лич­ных.

Аллергочип не требует отмены никаких лекарств перед сдачей.

Если вам не нужна информация по всем 112 компонентам, можно отдельно сдать анализ на мажор — минор нужного аллергена методом ImmunoCAP.

Отдельная статья про аллергочип

ALEX Allergy Explorer

Австрийский молекулярный аллерготест, определяет наличие реакции на 282 аллергена. Распространен в Европе и на постсоветском пространстве.

Не требует отмены лекарств.

Скачать список аллергенов анализа Alex Allergy Explorer (.pdf 630Kb)

Отдельная статья о тесте ALEX

Преимущества молекулярной диагностики:

  1. Позволяет произвести исследование на широкий спектр аллергенов, без риска для здоровья — в отличие от царапок и провокационных тестов.
  2. Огромный плюс молекулярной диагностики в том, что в большинстве случаев не требуется отмена лекарств.
  3. Требуется малое количество крови для анализа.
  4. Тест не имеет возрастных ограничений и назначается даже грудничкам.
  5. В Москве, на молекулярный анализ, можно сдать капиллярную кровь (из пальца). В других городах это сделать затруднительно из-за нюансов транспортировки и хранения крови. Оборудование для диагностики пока есть только в Москве, куда и доставляют кровь на анализ.
  6. Мо­ле­ку­ляр­ная аллергоди­а­гно­сти­ка, позволяет отличить ис­тин­ную аллергию от перекрестной реакции.
  7. Мо­ле­ку­ляр­ная ди­а­гно­сти­ка необ­хо­ди­ма в под­бо­ре правильного аллергена для проведения АСИТ (ал­лер­ген-спе­ци­фи­че­ской им­му­но­те­ра­пии), у людей с множественной (поливалентной) аллергией.
  8. Доказано, что ис­поль­зо­ва­ние ме­то­дов мо­ле­ку­ляр­ной ди­а­гно­сти­ки за­став­ля­ет сме­нить АСИТ, по­до­бран­ную по ре­зуль­та­там кож­ных прик-те­стов.

Показания к молекулярной диагностике:

  • Оценка целесообразности и эффективности АСИТ.
  • Для правильного выявления главного виновника (триггера) реакции у пациентов с множественной (поливалентной) аллергией.
  • Недостаточная информативность других методов аллергологических исследований.
  • Желание ранней диагностики аллергии и ее дальнейшее предотвращение.
  • Определение оценки риска возникновения аллергических реакций, без проведения провокационных проб.

Наша история

2 года назад я сдала своему ребенку аллергочип в Санкт-Петербурге. И понеслось ????

Вопросов было больше чем адекватных ответов на них. Во-первых, метод достаточно новый, хотя в Москве уже лет как 7 проводили молекулярную диагностику на аллергены. В Петербурге так же делали аллергочип лет 5, но ни один аллерголог, к моему удивлению, не назначил моему ребенку этот анализ.

Лично я узнала об аллергочипе от подруги из Германии. В Европе это обязательный метод обследования аллергиков с множественной (поливалентной) аллергией, особенно перед проведением АСИТ.

В России, как оказалось, достаточно много аллергологов вообще скептически относятся к методу молекулярной диагностики, отдавая предпочтение все тем же царапкам.

У нас мало просто сдать аллергочип, нужно еще попыхтеть и найти грамотного аллерголога, знающего белки аллергенов и способного полностью расшифровать результаты анализов. В грамотных руках аллергочип источник огромного количества полезной информации.  Он дает понимание:

  • с чего все началось,
  • какой белок виноват,
  • нужен ли АСИТ,
  • поможет ли АСИТ,
  • на какой продукт может быть аллергическая реакция,
  • какая реакция может быть (отек квинки или только оральный синдром),
  • куда лучше уехать во время цветения аллергена,
  • есть ли риск развития астмы.

Это очень важные вопросы для аллергика, на которые привычные и стандартные анализы — кровь обычным методом, метод ДТК, царапки, прик-тесты — дают лишь приблизительные ответы.

В Петербурге я нашла лишь пару аллергологов, которые смогли мне помочь с расшифровкой результата аллергочипа. Однако большую часть информации на тему перекресты к перекрестам я получила от аллергологов за границей.

2 года назад в Санкт-Петербурге я нашла только один вид молекулярной диагностики — аллергочип. Сейчас лаборатории предлагают несколько вариантов исследований, которые я перечислила выше.

Статьи по теме:
Аллергочип
Аллерготест ALEX
Какие анализы можно сдать методом ImmunoCap
Иммуноглобулин G (IgG) и анализ ImmunoHealth

Источник

Учитывая динамику аллергизации планеты, метод молекулярной диагностики ImmunoCAP быстро приобрел популярность среди тех, кто действительно надеется вылечить аллергию, а не просто всю жизнь писть антигистаминные средства.

А. Что такое Иммунокап?

Это лабораторное исследование, для которого сдается венозная кровь.

В чем его принципиальное отличие от обычных анализов на аллергию (аллергопанелей)?

В отличие от традиционных методов, он не дает ложных результатов, а также освещает нюансы.

ImmunoCAP позволяет не только определить концентрацию специфических антител IgE к пищевым, бытовым, пыльцевым, грибковым аллергенам, но и оценить отдельные аллергокомпоненты. Изучение аллергокомпонентов позволяет реализовать современную концепцию молекулярной аллергологии, когда диагностика и лечение пациентов с аллергией осуществляется на абсолютно новом уровне.

Например, аллергокомпонентами белка куриного яйца являются овальбумин и овомукоид, а коровьего молока – казеин, лактоглобулины, сывороточный альбумин. Благодаря обследованию на аллергокомпоненты, можно прогнозировать риск тяжелых аллергических реакций, развитие толерантности, а также сразу правильно составить рекомендации по питанию с учетом полученных данных о возможности употреблять термически обработанный продукт или исключить его вовсе.

Если немного сложно для понимания, что такое молекулярная диагностика, то попытаюсь объяснить на приобретенном опыте.

Простой анализ на аллергию может дать ложноположительный результат (по кожным пробам), и АСИТ может быть начата не с того, что нужно. Может быть также и ложноотрицательный (по крови или же по кожным пробам на фоне приема антигистаминных). А вот для ImmunoCAP

прием антигистаминных препаратов и возрастные особенности не влияют на качество и точность исследования.

У сына, к примеру, есть реакция на березу и яблоко, и это только доказывает, что общее таки в генах у этой зелени есть. При этом яблочный сок вызывает реакцию, а, например, компот из сухофруктов нет. Почему?

Используя возможности ImmunoCAP можно разобраться в феномене перекрестной реактивности, объяснить причину ложноположительных результатов при кожном тестировании между пыльцевыми и пищевыми аллергенами. Часто встречаются перекрестные реакции между такими аллергенами как: береза-яблоко, полынь-горчица, персик, лебеда-дыня, тимофеевка-томат.

Кроме того, у сына есть реакция на кота, лошадь и свинину, а это также из одной оперы звери, насколько я дочиталась в зарубежных источниках. Что делать в этом случае? Не есть мясо, избегать пони? Ответ проще: вылечить аллергию на кота. Но возможно ли это, в принципе? Мажорный или минорный аллерген вызывает чувствительность?

По способности вызывать иммунный ответ аллергены классифицируют на мажорные и минорные

Мажорные аллергены – доминантные антигенные детерминанты, содержащиеся в большом количестве, более крупные по размеру и более иммуногенные. Минорные аллергены меньше по размеру и количеству, обладают меньшей иммуногенностью. Из-за достаточно высокой гомологичности белковых структур возможно проявление значительного иммуногенного сходства, что может послужить причиной перекрестной иммунологической реактивности .

Например, главным мажорным аллергеном пыльцы березы с самым большим вкладом в развитие аллергической реакции, является гликопротеин Bet v1 с молекулярной массой 17 кДа, входящий в суперсемейство PR-10 (Superfamily of pathogenesis-related proteins).

Белки PR-10 содержатся в пыльце деревьев (береза, лещина, ольха, дуб) и некоторых продуктах растительного происхождения (морковь, яблоко, персик, арахис, киви, соя, сельдерей). Употребление любого из этих продуктов может вызывать развитие орального аллергического синдрома.

Разница мажорных и минорных аллергенов еще и в том, что от мажорных есть лекарства (АСИТ — аллергенспецифическая иммунотерапия — единственная терапия, лечащая причину аллергического заболевания).

Почему именно молекулярная диагностика? Для чего в конечном итоге это нужно?

1. Молекулярная диагностика помогает найти «начало начал», то есть причину, которую и нужно лечить, прививая устойчивость к раздражителю.

2. Этот метод помогает в лечении тех пациентов, которые страдают сразу от нескольких разных, не связанных аллергенов.

Определение компонентных рекомбинантных аллергенов березы, тимофеевки, клещей домашней пыли методом ImmunoCAP позволяет детально оценить профиль чувствительности пациента и прогнозировать эффективность аллергенспецифической иммунотерапии (АСИТ).

Эта детальная оценка состоит не только в том, что «от кошки надо аллергию убрать» (как, например, делают после кожных прик-тестов), но и узнать, какой именно белок кошки вызывает бунт.

Чаще всего виновником аллергии является белок Fel d 1, находящийся в слюне и сальных железах животного. При умывании кошка переносит этот белок на кожу, кожа подсыхает и затем вместе с перхотью попадает в потоки воздуха.

Как вы, наверное, поняли, у кошек несколько аллергенов — тоже мажорные и минорные. Какой в случае сынули, мы не знали (было лишь известно, что три плюса по кожным пробам). А мажор или минор, как вы поймете ниже, ввиду цены АСИТ, лучше таки знать.

Б. Личный опыт

Итак, для сына был проведен тест ImmunoCAP в лаборатории Экомед на мажорные аллергены, то есть те, от которых есть лекарство, восприимчивость к которым реально понизить.

1. Проверяли реакцию на бытовые аллергены (клещи домашней пыли, грибки) уже после проведенного курса АСИТ винницкими драже.

2. На всякий случай проверили реакцию на внешнюю плесень (дело было в сырой период, и было явное обострение астмы, заподозрили, что причина в сырых листья либо земле в цветах). Но мимо (к счастью, иначе я бы не оставила ни одного комнатного растения, как минимум).

3. Помимо этого готовились к курсу лечения аллергии на кота (АСИТ Оралтек (Oraltek), а потому делали два мажорных аллергена кота. И как показал тест, все-таки это был «кот». Были подозрения на тот момент, что соседский ремонт (раньше там жили кошки), возможно, сыграл свою роль в обострении. Кому интересно, связь ниже описывается по ссылке.

В. Цена вопроса

Цена анализов в сумме составила примерно 4000 грн. ($150). И это очень узкая инфа, не развернутый скрининг, а прицельная, исходя из уже имеющихся ранее исходников, наблюдений и тестов.

Для сравнения, а стоит ли пойти в Синево и за тысячу сдать «классические» аллергопанели по крови? ИМХО, не стоит. Куча знакомых с ложноотрицательными результатами пьют Эриус и Цетрин.

Вот так выглядит реальность на фото для тех скептиков, кто верит в обычные панели по крови.

Фото кожной пробы и фото результута на мажорные аллергены методом молекулярной диагностики.

1. По кожным тестам — три плюса.

2. По молекулярке — один аллерген чисто, второй — в 795 раз выше нормы. И точно мажорный.

В 795 раз!!!

Наверное, при таком результате только пофигист будет продолжать сидеть на Цетрине. Я лично сразу решила купить Oraltek Cat dander (Oraltek Inmunotek, Испания) для проведения АСИТ. Это спрей для рта, о нем пока еще время не пришло писать. Вот так он выглядит.

Здесь, наверное, бессмысленно писать, что можно не заводить котов, в этом отзыве (в конце под цитатой) я уже переводила зарубежный источник о том, как переносятся кошачьи аллергены с торнадо и даже в волосах кошачьих хозяек по всем помещениям, в том числе и школам.

Преимущества ImmunoCAP:

+ определение корня зла;

+ возможность понять перспективы: можно ли потенциально вылечиться с помощью АСИТ;

+ возможность две недели хранить генетический материал (кровь), чтобы досдать по запросу еще какие-то варианты. То есть ехать никуда не надо второй раз истязать дитё.

Недостатки ImmunoCAP:

— цена.

Хотя условно на Пульмикорт (Фликсотид), Вентолин, Сингуляр и антигистаминные все равно выйдет больше, чем молекулярная аналитика и АСИТ. Ну, это мое личное мнение. АСИТ Oraltek, впрочем, тоже не дешевое удовольствие — 200 евро на четыре месяца-полгода, в зависимости от дозировки.

Вроде все. Вот такое мнение у меня сложилось. Добавлю, что, помимо ImmunoCAP, есть еще один такой же по точности метод (это если вам вообще не от чего оттолкнуться, и вы хотите иметь полную картину). Это австрийский молекулярный аллерготест ALEX, благодаря которому можно провериться на чувствительность к 282 аллергенам за один раз. Стоит он 200 евро. Поинтересуйтесь у вашего аллерголога.

Источник